Luciferin нь люциферазын илэрхийлэлийг in vitro дүрслэлд ашигладагэнгийн биолюминесцент сурвалжлагч юм. Firefly luciferase ферментийн (ихэвчлэн Photinus pyralis-ийн) усанд уусдаг энэхүү субстрат нь ATP болон Mg2+-ийг хүчилтөрөгчийн дэргэд шар-ногоон ялгаруулалтыг ялгаруулах ко-фактор болгон ашигладаг.
D-Luciferin юу хийдэг вэ?
Люциферин нь люцифераза -ийн илэрхийлэлийг in vivo дүрслэлд ашигладаг энгийн биолюминесцент сурвалжлагч юм. Галт шувууны люцифераза ферментийн усанд уусдаг энэхүү субстрат нь ATP ба Mg2+-ийг хүчилтөрөгчийн дэргэд шар-ногоон ялгаруулалтыг ялгаруулах кофактор болгон ашигладаг., энэ нь 37°C-д in vivo улаан гэрэлд шилждэг.
D-Luciferin кали гэж юу вэ?
Дэлгэрэнгүй. D-Luciferin калийн давс нь ферментийн галт шувууны люцифераза ашигтай субстрат юм. Люцифераза ферментээр исэлдэх үед биолюминесценц үүсдэг. D-Luciferin-ийг сонирхсон дэмжигчтэй холбоотой люцифераза генийн илэрхийлэлийг шинжлэхэд ашиглаж болно.
Та D-Luciferin-ийг яаж хийдэг вэ?
1. Ариутгасан усанд 200X люциферины уусмал (30 мг/мл) бэлтгэнэ. Люциферин бүрэн уусах хүртэл урвуу байдлаар зөөлөн холино. Цаашид ашиглахын тулд шууд хэрэглээрэй, эсвэл хэсэгчлэн аваад -20°C хэмд хөлдөөж болно.
Люцифериныг яаж тарьдаг вэ?
(Люцифериныг ихэвчлэн хэвлийн дотуур эсвэл судсаартарина.) Жишээ: 10 мкл-ээр тарина. Биеийн жингийн грамм тутамд люциферины нөөцийн уусмал (стандарт 150 мг/кг тарилга хийхэд 20 г хулганад ихэвчлэн ~200 мкл). 5. Люциферазын дохионы дээд цэгийг авахын тулд зураг авахаасаа өмнө 10-20 минут хүлээнэ үү.