Нэгдүгээрт, EcoR1 болон Xba1 хоёулаа ДНХ-г задлахдаа 5' гажиг үлдээдэг (Nde1 шиг). Аль ч тохиолдолд 3' төгсгөл нь хонхорхойтой байдаг тул полиермас нь суурь нэмж болно. Хоёрдугаарт, бүх полимеразууд зөвхөн 3' төгсгөлд суурь нэмэх боломжтой тул Klenow нь хоѐр талбайн ухарсан 3' төгсгөлд 4 суурийг нэмж мохоо үзүүрийг үүсгэнэ.
Хязгаарлалтын ферментүүд 5 фосфат үлдээдэг үү?
Хязгаарлалтын ферментээр шингэсэн векторууд болон оруулгууд нь шаардлагатай төгсгөлийн өөрчлөлтүүдийг (5' фосфат ба 3' гидроксил) агуулдаг бол Полимеразын гинжин урвалаар (ПГУ) үүсгэсэн хэсгүүд агуулаагүй байж болно.
Мохоо үзүүрийг холбож болох уу?
Мохоо үзүүрийг залгахад
Мохоо үзүүрийг залгахад цухуйсан үзүүрүүдийн суурь хосолдоггүй тул ямар ч мохоо үзүүрийг өөр мохоо үзүүрт холбож болно. SmaI болон EcoRV зэрэг хязгаарлалтын ферментүүд мохоо үзүүрүүдийг үүсгэж болзошгүй.
Так полимераз нь мохоо үзүүр үүсгэдэг үү?
Тийм… Так Полимераз нь ПГУ-д 72 dC-д сунгах эцсийн шатыг хадгалвал A-хэтжилтийг нэмдэг. Ихэвчлэн ТТ клонд ашигладаг.
Яагаад Кленовын фрагментийг ДНХ-ийн дараалалд ашигладаг вэ?
Кленовын фрагмент нь судалгаанд суурилсан ажлуудад маш хэрэгтэй, жишээлбэл: Нэг судалтай загвараас давхар хэлхээтэй ДНХ-ийн синтез . ДНХ-ийн хэлтэрхийнүүдийн 3' үзүүрийг дүүргэж, 5'-г мохоо болгох . Цухуйсан 3' гөлгөрийг задлах.
