Трипсинизаци гэдэг нь уураг задалдаг протеолитик фермент болох трипсиныг ашиглан наалдсан эсийг өсгөвөрлөж буй савнаас нь салгах үйл явц юм. Эсийн өсгөвөрт нэмэхэд трипсин нь эсийг судсанд наалдуулах боломжийг олгодог уурагуудыг задалдаг.
Бид яагаад эсийг трипсчилдэг вэ?
Трипсинзаци нь ихэвчлэн эсийг шинэ саванд шилжүүлэхийг зөвшөөрөх, туршилт хийх зорилгоор ажиглалт хийх, эсвэл колбонд агуулагдах хольцын түвшинг бууруулах зорилгоор хийдэг. эсүүд.
Трипсин эсийг салгахад хэрхэн нөлөөлдөг вэ?
Трипсин/EDTA нь эсийг салгах хосолсон арга юм. Трипсин нь дээд талын амин хүчилнь пролин биш бол С-терминал дээрх лизин эсвэл агинин дээр наалддаг уургийн амин хүчлийг таслан эс-эс ба эсийн матрицын харилцан үйлчлэлийн наалдац уургийг таслана.
Та трипсинжүүлсэн наалдсан эсийг яаж авах вэ?
Журмын
- Өсгөвөрлөгчийн савнаас соруулж авч, нэг давхаргад Ca2+, Mg агуулаагүй давсны уусмалаар угаана. 2+ нь ийлдсийн бүх ул мөрийг арилгана. …
- Трипсин эсвэл трипсин/ЭДТА-ийн уусмалыг өсгөвөрлөх саванд(ууд) хангалттай хэмжээгээр хийж, эсийн нэг давхаргыг бүрхэж, 37 °C инкубаторт ~2 минут байлгана.
Би эсийн өсгөвөрт трипсиныг хэрхэн идэвхгүй болгох вэ?
Нүднүүд салсан болмогц 2 боть нэмнэ үү трипсиныг идэвхгүй болгохын тулд урьдчилан халаасан бүрэн өсөлтийн медиа. >95% эсийн нөхөн сэргэлтийг хангахын тулд эсийн давхаргын гадаргуу дээр хэд хэдэн удаа пипеткээр зөөлхөн тараана. Сийвэнгүй өсгөвөрийн хувьд шар буурцгийн трипсин дарангуйлагч (Бүтээгдэхүүний дугаар
